Jeder Gegner, der beim Tod Münzen fallen lässt, kann einen Schlüssel fallen lassen – nicht nur Biom-exklusive Gegner. Das bedeutet, dass Meteorenköpfe, Gegner, die durch Statuen erschienen sind, Tiere und Gegner der Mondsäulen aus der Mondinvasion keine Biomschlüssel fallen lassen.
Biomschlüssel können nicht zum Öffnen ihrer Truhe verwendet werden, bis Plantera besiegt wurde. Bis dahin haben sie den Tooltip„Wurde von einer mächtigen Dschungelkreatur verflucht“. Diese „verfluchten“ Schlüssel können allerdings problemlos in Welten verwendet werden, in denen Plantera bereits einmal besiegt wurde.
Die Wahrscheinlichkeit, dass ein Schlüssel bzw. eine Schlüsselform fallen gelassen wird, steigt, je mehr Gegner besiegt werden. Eine große Anzahl von Gegnern gleichzeitig gibt es üblicherweise während Events oder manchen Bosskämpfen.